Especificaciones

Es un medio de Wilson Blair modificado y altamente selectivo para aislar Salmonella typhi, así como otros bacilos entéricos de heces aguas negras, aguas de bebidas y diversos alimentos.

Preparación:

1.- Suspender 52 g del medio deshidratado en un litro de agua purificada aunque en general, los autores ingleses recomiendan no reconstituir más de 400 mL en un solo matraz para lograr una mejor uniformidad de mezclado.

2.- Mezclar muy bien y remojar el medio deshidratado de 10 a15 minutos para obtener un buen gel.

3.- Hervir no más de un minuto agitando continuamente el Agar.

4.- Dejar que el medio se enfríe a 45ºC (Esto es muy importante) y sin dejar de agitarlo, vacíe en placas de Petri no menos de 20 mL de medio fluido. Las placas deben permanecer parcialmente descubiertas hasta que se seque la superficie del medio y usarlos el mismo día. Evite el sobrecalentamiento.
La selectividad del medio depende en gran parte de la dispersión uniforme del precipitado del sulfito de bismuto en el gel final. Es por esta razón que el medio debe mantenerse bien mezclado y no vaciarse mientras esté demasiado caliente.

En el medio caliente una vez depositado en las placas, tiende a precipitarse el sulfito de bismuto en forma irregular y desordenada propiciando que en unas zonas se encuentre demasiado concentrado y en otras casi sin nada o ausente.

Las placas delgadas con poco medio se desecan pronto y dan reacciones retardadas inhibiendo el ennegrecimiento de las colonias productoras de sulfuros, debido a la concentración de los ingredientes.

Usos:

Junto a este medio, por ser fuertemente inhibido, se aconseja inocular también otros medios selectivos menos inhibidores, tales como Agar Eosina y Azul de Metileno (Cat. 210600), Agar MacConkey (Cat. 210900) Agar XLD (Cat. 211741), Agar Entérico Hektoen (Cat.224400), Agar SS (Cat. 214400), etc. Por lo común, El Agar Sulfito de Bismuto se siembra por estría superficial tratando de obtener colonias muy aisladas. Pueden hacerse inoculaciones por vaciado de una suspensión de heces como de 10% en agua destilada o en solución salina estériles. Vaciar aproximadamente 5 mL de la suspensión en no menos de 20 mL del medio previamente fundido y enfriado a unos 45-50ºC. Mezclar perfectamente, dejar que se gelifique e incube de 24 a 48 horas.

Las placas una vez solidificadas deberán presentar una opacidad crema uniforme, y gradualmente un color verde muy pálido. Si se guarda en refrigeración, el medio que está en forma reducida se irá oxidando poco a poco hasta adquirir un color francamente verde. al llegar a este momento descártelo. Cook (1952) recomienda dejarlo en refrigerador durante 4 días antes de usarlo para aislar Salmonella typhimurium con el fin de hacerlo menos inhibidor.

En presencia de H2S las Salmonellas reducen las sales de hierro y bismuto a sulfuro de hierro negro que se deposita en la colonia, y a bismuto metálico (Mac Coy, 1962) que se precipita en el medio de cultivo, formando un halo brillante pero menos obscuro alrededor de la misma. Tanto el color negro de la colonia como el brillo metálico del halo aumentan si la placa se deja de 2 a 3 horas a temperatura ambiente en presencia de la luz.

Las colonias de coliformes, Shigella (que generalmente no desarrollan) y Proteus presentan un color verde, café o negro y no ennegrecen el medio. las placas deberán incubarse hasta 48 horas.

Peptona de Caseína	5.0 g
Peptona de Carne	5.0 g
Extracto de Carne	5.0g
Dextrosa	5.0 g
Fosfato Disódico	4.0 g
Sulfato Ferroso	0.30 g
Indicador de Sulfito y Bismuto	8.0 g
Verde Brillante	0.025 g
Agar	20.0 g
pH final 7.5 ± 0.2