Especificaciones

El Agar Citrato de Simmons se usa para diferenciar las bacterias entéricas Gram Negativas, basándose en la utilización del citrato. Recomendable para la diferenciación de coliformes asilados del agua.

Preparación:

1.- Suspender 24.2 g del medio deshidratado en un litro de agua purificada.

2.- Dejar remojar de 5 a 10 minutos.

3.- Mezclar bien y calentar agitando frecuentemente hasta ebullición y completa disolución.

4.- Distribuir volúmenes de 3 mL en tubos de 13 x 100 mm.

5.- Esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos.

6.- Los tubos se dejan enfriar en posición inclinada de manera que el medio de cultivo en el fondo del tubo alcance una profundidad de 1 a 1.5 cm. Se puede emplear también como medio en placas.

Usos:

Este medio se puede emplear de la misma manera que el citrato de Koser para hacer la prueba de utilización de citrato como una de las reacciones del IMViC. Pueden hacerse cultivos en placa, o si se prefiere el medio inclinado, se inocula estriando la superficie y puncionando el fondo. Los cultivos se incuban durante 4 días de 35 a 37ºC. Si no se obtienen resultados precisos, lo cual puede suceder con cepas de Providencia, es necesario hacer nuevas pruebas incubando a temperatura ambiente durante 7 días. Solamente los microorganismos que utilizan el citrato como única fuente de carbono, crecen en el Agar Citrato de Simmons.

La aparición de un crecimiento visible generalmente va acompañado de un cambio alcalino (azul) indicador.

Fosfato Dihidrogenado de Amonio	1.00 g
Fosfato Dipotásico	1.00 g
Cloruro de Sodio	5.00g
Citrato de Sodio	2.00 g
Sulfato de Magnesio	0.20 g
Agar	15.00 g
Azul de Bromotimol	0.08g
pH final 6.9 ± 0.2